Что такое ДИК-микроскоп?
Дифференциально-интерференционный контрастный микроскоп (ДИК), также известный как микроскоп Номарски, — это оптический микроскоп, предназначенный для просмотра бесцветных и прозрачных образцов. Он был изобретен Джорджем Номарски в 1954 году, используя специальную призму, известную как призма Номарски, для повышения контрастности изображения без окрашивания образца.
Применение ДИК-микроскопов
Микроскопы DIC бесценны при наблюдении за биологическими материалами, такими как клетки, где традиционные оптические микроскопы не справляются из-за прозрачности таких образцов. Эта техника позволяет проводить детальное исследование живых клеток и их внутренних структур без необходимости использования красителей или пятен, сохраняя целостность образца.
Принцип работы микроскопов DIC
Микроскоп DIC работает, преобразуя естественный свет от источника в линейно поляризованный свет через поляризатор. Этот свет, проходя через призму Волластона, разделяется на два луча с ортогональной поляризацией. Эти лучи пересекают образец, накапливают разность фаз и рекомбинируют во второй призме Волластона. Рекомбинированный свет, теперь демонстрирующий интерференционные узоры, подвергается поляризации в том же направлении, прежде чем достичь наблюдателя, делая прозрачные образцы видимыми в трех измерениях.
Структура микроскопов DIC
По сути, DIC-микроскоп включает стандартную установку микроскопа светлого поля, дополненную двумя поляризационными пластинами и двумя призмами Номарского. Такая компоновка обеспечивает универсальное использование; удаление призм Номарского и поляризаторов возвращает систему к обычному микроскопу светлого поля или поляризационному микроскопу соответственно. Путь света от источника к наблюдателю в DIC-микроскопе включает последовательное взаимодействие с поляризатором, призмой Волластона, предметным столиком, объективом, второй призмой Волластона, анализатором и окуляром, что облегчает визуализацию интерференции поляризованного света и возникающих в результате разностей оптических путей.
Как выбрать DIC-микроскопы
DIC-микроскопия особенно эффективна для исследования неокрашенных биологических образцов, включая одноклеточные организмы, культуры тканей и мелких многоклеточных животных. Она обеспечивает превосходное разрешение и четкость изображения по сравнению с микроскопией светлого поля, но менее эффективна для образцов с минимальным изменением показателя преломления от окружающей среды или для более толстых, сильно пигментированных образцов. Хотя ДИК-визуализация может обеспечить высококачественные изображения без артефактов при оптимальных условиях, при интерпретации необходимо учитывать ориентацию призмы, а для полной визуализации структурных деталей часто требуется вращение образца.